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羅丹明123溶液(0.5mg/ml)檢測方法!
更新時間:2019-04-16   點擊次數:1501次

羅丹明123溶液(0.5mg/ml)檢測方法!

 

Rhodamine 123是一種可以通過細胞膜的選擇性染色活細胞線粒體的熒光染料,呈黃綠色熒光。廣泛用作檢測線粒體膜電位,也常用于細胞凋亡檢測。它可以快速通過細胞膜,僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲,并且對細胞沒有任何毒性。

Rh123用于對許多種細胞進行染色,包括植物細胞和細菌。由于細胞內ATP的量與Rh123的熒光強度之間有相關性,因此Rh123被應用于檢測細胞內的ATP。

規格:100ul
保存:4℃,避光,
有效期:12個月
用途:線粒體膜電位檢測
說明:主要由羅丹明123、PBS組成,采用FACS檢測,激發波長511nm,發射波長535nm。

 

染色程序:

(1) 將0.4mgRh123溶解到1mL DMSO中制備成1mMRh123-DMSO溶液。
(2) 用載玻片準備細胞。細胞數目應為5×104~5×105個/mL。
(3) 孵育該載玻片,用PBS或Hank's液洗滌細胞。
(4) 用培養基稀釋1mM Rh123溶液以制備1~20µM Rh123緩沖液。
(5) 將Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育30分鐘至1小時。
(6) 去除Rh123緩沖液并用培養基洗滌細胞(洗滌細胞后為了固定,加入10%福爾馬林緩沖液并孵育15~20分鐘,接著用PBS洗滌)。
(7) 用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。

 

 

羅丹明123溶液(0.5mg/ml)檢測方法!

 

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